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Description
As imagens biológicas de ensaios de fluroescência de viabilidade celular serão fornecidas pelo grupo de Virologia do LNBio/CNPEM, liderado pelo Dr. Rafael Elias Marques.
As imagens foram capturadas em placas de 384 poços utilizando o sistema de microscopia Operetta CLS High-Content Analysis System (Perkin Elmer), com magnificação de 10x, capturando o campo central do poço. Os experimentos envolveram a infecção de células Vero CCL81 e HuH7.0 com diferentes vírus:
- Mayaro (MAYV);
- Coronavírus da síndrome respiratória aguda grave 2 (SARS-CoV-2);
- Oropouche (OROV);
- vírus da encefalite de St. Louis (SLEV).
As células foram tratadas com cerca de 7700 diferentes compostos, estocados em 100% DMSO, além de controles não infectados (negativo) e infectados (positivo), ambos sem tratamento. Todas as amostras, incluindo controles, continham 0,4% de DMSO.
A coloração celular foi realizada com o fluoróforo Hoechst 33342, um marcador de DNA, permitindo a segmentação dos núcleos celulares.
A aquisição das imagens no Operetta foi feita utilizando um filtro de excitação a 361 nm e emissão a 497 nm.